BDNF简介
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脑源性神经营养因子（BDNF）是神经营养因子家族中的一员，这对中枢神经系统和外周神经系统中某些特定的神经组份的分化和存活是必须的
。BDNF由分泌的前前体蛋白，经裂解成信号肽和前体蛋白后
，前体蛋白裂再裂解成119个氨基酸的成熟蛋白
。BDNF有六个保守的半胱氨酸残基








，在蛋白内部形成三个二硫键
。与NGF相似
，活性BDNF被预测为一个非共价结合的同源二聚体。BDNF 在中枢神经系统中广泛以自分泌和旁分泌的形式分泌出来
，具有刺激中枢神经的营养和分化的作用，已证明在记忆形成的过程中和染色体调控方面具有重要的作用


。此外


，在脑垂体、脊髓


，心肌和肺及平滑肌中也有低水平的表达。BDNF可与其高亲和力的受体TrkB酪氨酸激酶受体结合特异性的激活下游信号通路



。

BDNF在血浆中以pg/ml水平存在，但在血清中则以ng/ml水平存
，该差异明显是由于血小板中的BDNF的释放造成差异
。BDNF不同种属间在结构上的高度的保守性
，使得BDNF ELISA可以用于其它种属的BDNF的检测。

检测原理:

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中BDNF的浓度
。BDNF捕获抗体已预包被于酶标板上
，当加入标本或参考品时

，其中的BDNF会与捕获抗体结合

，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去



。当加入生物素化的抗BDNF抗体后，抗BDNF抗体与BDNF接合，形成夹心的免疫复合物，其它游离的成分通过洗涤的过程被除去
。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合


，亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来；其它游离的成分通过洗涤的过程被除去







。最后加入显色剂，若样本中存在BDNF将会形成免疫复合物





，辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质
，在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测

，读其450nm处的OD值，BDNF浓度与OD₄₅₀值之间呈正比，通过参考品绘制标准曲线，对照未知样本中OD值，即可算出标本中BDNF浓度


。

BDNF定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:

标本收集:

1.标本的收集请按下列流程进行操作

；

A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可；

B.血清标本应是自然凝固后
，取上清
，避免在冰箱中凝固血液；

C.血浆标本

，推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测，

D.标本收集后请分装，冻存于－20℃




，避免反复冻融。

2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；

3.标本应清澈透明，检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除
。

4.请勿使用溶血





，高血脂或污染的标本检测
，否则结果将不准确
。