一.  细胞特性

细胞名称

：A172细胞

，人胶质母细胞瘤细胞

生长特性
：贴壁 上皮样

种      属

：人

培养难度：★★

二． 培养条件

培养基


：90%DMEM+10%FBS（推荐HAKATA优等胎牛血清，货号:HN-FBS-500）

温度
：37℃     气相


：95%空气,5% CO2

三． 传代方式

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，.然后置于无菌操作台
，打开瓶口


，将其中的培养液去掉
，再往其中加入5-6mL新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养，根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，一般2到3天换一次液
；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%

，需要对其进行传代

，传代比例为1:2到1:4

；

3.传代步骤
：将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°预热
，倒掉培养瓶中的培养基






，往培养瓶中加入3-5 ml PBS

，轻晃洗涤后弃去


。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37°孵育消化（第一次消化需时常取出置于显微镜下观察

，以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为最佳消化时间
，记录最佳消化时间
，以便于下次消化），消化好后加入3ml完全培养基终止消化



。用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞

，使之完全脱落
，然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min

，弃上清，加入完全培养基重悬细胞
，进行传代。

四． 冻存条件

冻存条件：80%完全培养基+10%FBS+10%DMSO

(*建议使用本公司无血清细胞冷冻液（H-W-100），用4度保存的冷冻液重悬细胞，直接冻存于-80°C

。)

长期存储



：液氮

五． 供应限制

该产品仅供研究使用。

发货方式

尊龙凯时人生就是搏采取两种形式的细胞发货方式：

  1. 复苏发货

                  a. T25瓶活细胞发货

                  b. 血清重悬发货

  2. 冻存管发货(干冰发货)
 对于采取冻存管方式发货的客户
，为了保证可靠性尊龙凯时人生就是搏会多发一管细胞(共2管)


，干冰覆盖保温运输

。

复苏及冻存发货方式均为顺丰速运




，尊龙凯时人生就是搏会根据收货地址及温度差异采取不同的发货方式(T25/血清重悬/冻存/用户指定)
，并在发货前的3天内与您确认收货地址及配送方式。

尊龙凯时人生就是搏生物论文基金奖励方法

奖励对象
：

使用HAKATA系列产品(HAKATA全系列：血清

、冻存液
、试剂

、细胞株等)培养细胞并在中文核心期刊杂志或SCI期刊杂志发表文章，且文章中材料和方法栏中标注我公司品牌名或公司名(英文






：HAKATA或Shanghai Chuanqiu Biotechnology Co.,Ltd, China
，中文:HAKATA或尊龙凯时人生就是搏生物)

该奖励方案长期有效
，欢迎大家与尊龙凯时人生就是搏分享获得成果的喜悦！

详情：https://www.hualeizs.com/index.php?a=shows&catid=38&id=183