（1）单独冲洗，防止交叉反应造成污染
。

临床上每天检测的病例很多

，所用的抗体种类及项目也多


，如果在加入一抗孵育完后，将它们在一个缸内洗
，这样就会造成交叉污染








，影响最后的结果。正确的做法是单独地进行冲洗，冲洗的PBS为一次性，保证切片没有相互交叉污染的机会








。

（2）温柔冲洗，防止切片的脱落
。

冲洗切片，取出切片
，将PBS从上轻轻地冲洗
，让PBS自上而下流下来



，不要拿起切片将PBS对准切片冲洗，这样由于冲出的PBS有一定的冲击力
，很容易使切片周边引起松动

，导致切片的脱落。

（3）冲洗的时间要足够，才能彻底洗去结合的物质

。

冲洗切片有人提出用微振荡器振染，振下未结合的各种物，使之不产生背景，此种做法一是浪费时间

，二是很容易导致切片的脱落。切片的冲洗据实践认为
，用一小烧杯柔和地于切片上冲洗


，就能彻底冲洗去未结合的物质，无需附加其它条件



，冲洗好于切片上再注入PBS

，持续2分钟左右就完全足够了
。

（4）PBS的PH和离子强度的使用和要求
。

中性及弱硷性条件（PH7-8）有利于免疫复合物的形成
，而酸性条件则有利于分解；低离子强度有利于免疫复合物的形成


，而高离子强度则有利于分解
。

（5）常用试剂的配制和使用

。

在免疫组织化学的染色过程中



，用得最多的试剂就是缓冲液





，因为切片在整个染色中

，抗体的加、换、切片的冲洗
，DAB的配制都离不开缓冲液。可见缓冲液在整个染色中都起至关键的作用

，缓冲液的过酸或偏碱



，都将影响染色的结果


。