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如何正确的使用胎牛血清

胎牛血清是细胞培养重要的培养基且不可替代    ,它是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血 。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子     ,非常适合各种细胞的培养  。


因此  ,如何在使用过程中保护这些因子的活性   ,达到最大的细胞培养效果,就需要正确地使用胎牛血清。

正确地使用胎牛血清可分为以下四个方面:

1. 正确储存 ,避免反复冻融

1) 血清在-20°C冻存 。

2) 血清避免反复冻融 ,以免降低因子活性。如一次用不完 ,应进行分装  。

3) 血清和培养基应尽可能“现用现配”,配好的培养液 ,应于一周内用完。

4)血清避免在4°C或更高温度静置过久 ,否则会破坏血清中有效活性成分,影响血清品质。

2. 正确的融化

国际上流行的【血清融化三步法】可最大限度地保存血清中因子的活性 ,不会产生沉淀 ,同时能缩短血清融化时间。具体如下:


image.png

3. 关于胎牛血清的灭活

真正的胎牛血清因为胎牛没有形成有效补体   ,如果针对补体灭活的话 ,就不需要 。其他情况根据实验设计来决定。

4. 胎牛血清的浓度

胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基础培养基中,混合后配成完全培养基 。

曾有文献报道,不同胎牛血清浓度对细胞存在一定的影响 ,尤其是干细胞和原代细胞 。具体最佳浓度需要用户根据自己的实验来确定,以既保证培养的效果,又避免血清的浪费  。


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