牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份
，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。
1.提供对维持细胞指数生长的激素
，基础培养基中没有或量很少的营养物
，以及主要的低分子营养物


。
2. 提供结合蛋白
，能识别维生素
、脂类
、金属和其他激素等




，能结合或调变它们所结合的物质活力。
3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用
。
4.是细胞贴壁
、铺展在塑料培养基质上所需因子来源


。
5.起酸碱度缓冲液作用

。
6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活
，保护细胞不受伤害
。

胎牛血清都有哪些重要的指标

一
、内毒素
内毒素是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分
。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性。内毒素直接参与细胞凋亡
，血清中内毒素含量越低


，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代；内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化
。国际上规定，胎牛血清的级别




，应以内毒素水平的高低来确定

，其中
，特级胎牛血清的内毒素应<10EU/ml

二
、血红蛋白含量
胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色
、橘红色、微红色等
。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl
，颜色越红

，数值越高；反之
，数值越低
。实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度
，良好的操作能降低血清的溶血
。

三
、总蛋白含量
胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml

，数值偏高

，说明采血的牛龄偏大
，不是胎牛

；数值偏低
，表明血清可能掺水了
。

四

、pH值
根据药典
，胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间，并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。

五

、渗透压
胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法，渗透压摩尔浓度（mOsmol/kg）

：280-360之间

六
、微生物
包括细菌
、霉菌、支原体
、噬菌体等
。随着各个品牌血清生产条件的改善提高，细菌
、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制
。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。如CellMax胎牛血清



，3次0.1um无菌过滤以后，又通过培养法和DNA染色法进行支原体检测
，结果均呈现阴性才会放行销售


。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入，又无法过滤

，很难彻底清除，但对血清质量影响不大
，不过对于工业生产的客户来说

，往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。

七



、免疫球蛋白
免疫球蛋白的数值能完全体现出采血时的牛龄情况，新生牛血清容易产生IgM，IgG的含量也偏高


；胎牛血清不含IgM，IgG的含量也较低。可以通过血清蛋白电泳SDS检测
。
低IgG的胎牛血清推荐适用于抗体生产及相关领域。

有下列情况者
，对血清内毒素应格外留意筛选
：
1.养干细胞时

，干细胞对内毒素非常敏感，如果血清中内毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易死亡
。很多使用者


，在血清在试用前
，就通过提早审核该批次《检测报告》
，以决定是否入围进行试用。
2.养免疫细胞时
，过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子

，抑制小鼠红细胞集落的形成等。
3.基因敲除相关的细胞实验

，培养的细胞要尽可能保持其原始状态


，任何引导细胞衰老或凋亡的试剂

，都会让后续的实验结果“失之毫厘
，谬以千里”

。在准备血清和其他试剂时，选择极低的内毒素（最好≤1EU/ml）
，对实验至关重要；
4.原代培养
、杂交瘤融合、细胞转染，或者肝细胞

、神经细胞

、内皮等难养细胞的扩增，这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持
。因此，挑选更低的内毒素，是保证实验顺利的第一步。
5.实验室有些细胞
，需要长期培养、长期冻存


，或者经常复苏、经常培养的
，血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康
，都应该选用更低内毒素的血清，以避免内毒素长久对细胞的毒性影响
。
总之，血清中内毒素含量过高


，更容易导致细胞“亚健康”，造成数据不准，或细胞状态不良
、老化


、甚至死亡

，导致试验中断失败。血清中的内毒素越低越好。
全球细胞培养学会均依据内毒素对血清的品质进行分级和命名

。
内毒素含量越低的血清
，级别就越高

，以胎牛血清为例


：
当血清中内毒素含量≤10EU/ml时


，此血清为特级胎牛血清；
当血清中内毒素含量﹥10EU/ml


，≤ 25EU/ml时


，此血清为优级胎牛血清

；
当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时



，此血清为标准级胎牛血清
；