尊龙凯时人生就是搏使用FBS形式的Gibco来培养尊龙凯时人生就是搏的结肠癌细胞系(HCT-116,COLO-205,HT-29和SW-620)它没关系,具有良好的形态学外观,如数据库中,我进行了亚培养每2-3天一次。但是最近尊龙凯时人生就是搏开始使用另一家公司的FBS,但尊龙凯时人生就是搏意识到细胞的生长非常低,尊龙凯时人生就是搏每8-10天对它们进行传代培养,甚至形态形态也发生了变化。那么FBS(胎牛血清)的变化会影响细胞的质量吗?
你可能一开始没有看到新FBS的影响 - 细胞可以拥有可用于初始生长的细胞内储存(这是我测试~2周的原因之一 - 允许他们生长的FBS以前穿的虽然说实话,这应该会在几天内消失)。
除非细胞受到压力(例如低密度电镀或在毒素存在下电镀等),否则您甚至可能看不到任何影响。当受到压力时,细胞可能依赖于FBS中的因子(例如生长因子)来保持活力/分裂,这可能在“新”FBS中不存在/降低
。
当我进行FBS测试时,我故意以推荐的最低“分裂”水平培养细胞(即如果细胞产品表说接种1x10e5-3x10e5之间的新培养物,我将分裂到最低水平 - 这是我长大的第二个原因2周,每次分裂时重新设定所有培养物中的细胞密度)。这有助于突出FBS批次之间的差异。
对于某些细胞,一些FBS类型也会更好。您可能会发现来自“供应商X”的FBS比“供应商Y”中的FBS更好地支持Jurkat细胞的增长,但您的HeLa细胞在FBS中从“供应商Y”可能比从“供应商”X中的FBS更好(如果那讲得通?)。事实上,当我用上面提到的那些线测试Gibco和ATCC FBS时,我注意到了这种效应(尽管它的效果很小,而且一般来说质量好的FBS可以很好地支持大多数细胞类型)。
如果你不能回到你原来的FBS供应商那么你可以尝试通过在你的新FBS中培养它们来“血清适应”你的细胞 - 如果它们不死,它们最终可能会增加生长速度/生存力。细胞适应新的条件。
然而,这种“选择性压力”可能导致细胞丧失或获得一些表型功能(培养中的所有细胞都处于一定程度的选择压力下,这就是为什么尊龙凯时人生就是搏制造细胞工作区并且不会过度通过它们,因为它们最终会改变(表型漂移))。