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细胞冻存液比例是多少  ?

细胞冻存液比例   :

 

冻存液配制 :
20%胎牛血清  、10%DMSO   、70%1640培养液    ;或90%血清、10%DMSO      ,更可防止细胞内冰晶形成。
DMSO在4℃时对细胞无明显毒性  ,分子量小、溶解度大 、易透过细胞膜 ,降低细胞外未结冰溶液中溶质浓度 ,使细胞免受高浓度溶质的损伤,细胞内水分也不会过分外渗,避免了细胞过分脱水皱缩  ;DMSO与水分子结合   ,可使冰点下降 ,减少细胞内冰晶的形成    ,从而减少冰晶损伤.

FBS:DMSO 不是必须9:1, 这种方式太奢侈了  ,FBS很贵 ,且一般务必要,除非是贵重的淋巴细胞等 。 一般用完全培养基(含10-20%FBS)与DMSO按一定比例冻存,例如9     :1  或95    :5冻存  ,有一定偏差也是可以的  。

另外 ,还有一些是无血清培养的细胞  ,也不能添加血清,这时就用无血清培养基(根据细胞特性定制的培养基)加入5-10%的DMSO来冻存 。

总之     ,不是必须FBS:DMSO=9:1, 那是很古老的文献资料里常提到的冻存方案。

细胞类型和细胞株个体特性 。不同细胞有其最佳冻存条件,不尽相同,需参考说明书和文献。如果发现细胞冻存后状态不佳,需要自己摸条件    ,或考虑污染和培养条件问题 。

 细胞冻存液


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