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      为什么你的细胞生长缓慢 ?

      细胞生长缓慢的常见原因:

          (1)培养基可能缺乏细胞生长所需的某种因子 。

          通常情况下,当小伙伴购买细胞,并没有按照ATCC或国内细胞库推荐的方法制备培养基 ,使用实验室兄弟姐妹使用的培养基来培养细胞。解决方法一般是按照推荐的方法制备培养基,或直接购买培养细胞的培养基。(B)细菌、支原体、真菌等污染:虽然培养基中通常添加双抗体(青霉素和链霉素),但如果无菌操作观念不强 ,仍有可能造成污染。处理方法:如果有冷冻细胞,可以丢弃污染细胞。当然,丢弃并不是随意的,扔进垃圾桶。应按照实验室生物安全规定进行 。然后复苏培养物,建议培养箱完全消毒。

      如果不冷冻,而且这种细胞非常珍贵,常用的治疗方法是药物治疗:细菌污染加5-10倍的抗生素;真菌污染加抗真菌药物;支原体污染再加上抗支原体药物,具体药物可以咨询技术支持,他们会更加专业 。

          (C)许多细胞的生长依赖于密度。如果传代后细胞密度过小 ,也会影响细胞生长 。这段时间没有什么特别好的 ,就是更换液体。如果细胞培养瓶为T75,则可以消化 、离心、复苏,然后接种到T25瓶中 。

          (4)冷冻细胞中添加DMSO(二甲基亚砜)的量不正确 ,没有逐渐梯度冷却 。下一次恢复后的细胞总是坏的 。处理方法:按推荐的冷冻保存方法制备冷冻液。部分细胞适合10% DMSO,部分细胞适合5% DMSO;严格遵循渐变冷却的原则,细胞恢复后迅速解冻。

          (5)换液间隔时间太长 。一些小伙伴真的把细胞“佛”系生长。当他们想到它的时候,才会换下液体,相信一个句子 。“你已经是一个成熟的细胞了 。你应该学会养活自己 ,成长”。在这种情况下,细胞培养瓶中积累了大量的细胞代谢废物 ,影响细胞活性。推荐:勤奋点

          (6)细胞的“消化”时间不宜过长,减少对细胞的损伤;此外,EDTA一般添加到胰腺酶中 ,螯合钙离子  ,影响细胞粘附。治疗方法:控制细胞“消化”时间 ,尽量去除干净的胰蛋白酶和EDTA 。

          PH值:细胞需要在一定的PH值下生长,这个小朋友知道。但是很多时候PH值是尊龙凯时人生就是搏忽略的东西 ,这也是想强调的一点  。随着使用时间的增加,尊龙凯时人生就是搏使用的介质可能会慢慢变成碱性!(当然,它也可能变酸,但改变碱是常见的)。一般来说 ,过碱的培养基会影响细胞的生长 。治疗:简单的方法就是更换新鲜的培养基!当然,如果你有时间和条件,你可以调整介质的pH值。

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      上海尊龙凯时人生就是搏生物科技有限公司
      Shanghai Chuan Qiu Biotechnology Co.,Ltd.
             公司主要依托复旦大学 、同济大学等上海地区多家著名高校,拥有一支富有经验的开发团队,专业从事细胞及细胞...
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