能量来源：谷氨酰胺
L－谷氨酰胺是一种氨基酸，细胞的重要能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。同时L-谷氨酰胺不稳定
，在中性的水溶液中会自发降解； 降解产物对细胞有毒性 （对干细胞，原代细胞影响尤其大）。能影响细胞活性、蛋白表达水平及糖基化模式等
。那如何解决呢？

方案有二
：

 选择不含谷氨酰胺的培养基
，自己添加

选择稳定的谷氨酰胺替代物

经过科学家不断努力，终于找到了稳定的谷氨酰胺替代物： glutaGRO。它有何方功能呢？原来，它是由L-丙氨酸和L-谷氨酰胺缩合形成的二肽
，稳定性高，可在室温下保存，2年稳定 （谷氨酰胺需冷冻保存），使用更方便。同时不易降解
，不产生有毒性氨，更利于细胞生长。但仍需注意：该替代物适于哺乳动物细胞培养，但不适合昆虫细胞培养体系

！！！

能量来源 : 丙酮酸 (Sodium Pyruvate)
丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源
。当葡萄糖不足的时候，细胞可以代谢丙酮酸钠，保证细胞更好地生长。同时某些对葡萄糖利用存在问题的细胞必需添加哦。

平衡盐溶液

平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成；它的作用是维持细胞渗透压平衡
，保持pH稳定及提供简单的营养
；同时用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗

、配制其他试剂等。

它由这些小伙伴组成
：PBS 磷酸盐缓冲液
，DPBS（Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines）
， Earle’s 平衡盐， Hank’s 平衡盐。

培养基中的pH缓冲剂

绝大多数细胞的最佳生长条件是pH 6.8-7.8
。

多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲
，碳酸氢钠的缓冲需要二氧化碳。其中高碳酸氢钠 (1.5 – 3.7g/L) 需要 5 – 10% CO2

，低碳酸氢钠(0.35g/L) 不需要二氧化碳孵箱
。当然
，也有不依赖于二氧化碳的氢离子缓冲剂如：HEPES

，在一定范围内对细胞无毒性作用。能较长时间控制恒定的pH范围，保证细胞的良好生长。大家可以根据细胞和实验要求具体选择。