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      血清出现沉淀如何处理 ?

      血清沉淀是什么 ?

      血清中经常会出现肉眼可见的沉淀,其成分有多种类型,产生的原因有很多,主要有纤维蛋白 、磷酸钙还有一些其它成分。

      1. 纤维蛋白(Fibrin)

      血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型 。由于在生产过程中,血清采集、过滤(3 次 0.1 μm过滤)和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原(Fibrinogen)处于溶解状态 。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集 ,形成肉眼可见的沉淀 。

      2. 磷酸钙(Calcium Phosphate)

      这是一种常见的沉淀成分 ,通常会造成血清出现云雾状浑浊 。当产品在 37℃保存时,这种现象尤其明显 ,在倒置显微镜下可观察到小黑点的存在。这些小黑点在布朗运动的作用下四处游动 ,常被误认为是微生物污染。

      3. 其他成分(Other) 

      血清中的其他成分也会形成沉淀 ,例如胆固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等 。

      血清沉淀会影响细胞培养吗 ?


      1. 细胞生长

      尊龙凯时人生就是搏在出厂前都会对血清进行一系列质检测试 ,确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明 ,其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集,形成肉眼可见的沉淀。


      2. 怀疑污染

      磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧 。一般情况下,当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时 ,常将其存放在 4℃冰箱中观察 ,并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多,反而会使血清更加浑浊,进而误以为存在血清污染。并且,在倒置显微镜下 ,可在血清中观察到四处游动的小黑点(磷酸钙颗粒的布朗运动) ,更容易使人误以为存在微生物污染 。


      为防止这类误解的产生 ,尊龙凯时人生就是搏不建议客户培养血清来验证是否存在污染,而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养,以观察是否有细菌的增殖。并且 ,进行革兰氏染色 ,并在油镜(100 X 10 倍)下观察可直接确认是否存在微生物污染。

      怎样操作可以尽量避免沉淀出现?

      1. 正确解冻

      首先,应按照逐步解冻的方式正确解冻血清:从-20℃取出后,置于 4℃冰箱缓慢解冻,最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻 ,则非常容易产生沉淀。在解冻过程中,请注意时不时缓慢摇晃瓶子,减少沉淀的产生。为避免反复冻融,建议您将血清分装使用。


      2. 使用和保存注意事项

      血清沉淀很难预测和避免 ,出现沉淀后也无需担忧,这并不会影响血清的品质 。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能 :

      1) 热灭活;

      2) 37℃培养;

      3) 反复冻融;

      4) 伽马射线照射; 

      5) 2-8℃长期保存 ; 

      6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中(温度不稳定)。

      总 结 :

      血清产品中出现沉淀属于常见现象 ,但不会影响血清的品质 ,对细胞培养而言也是没有任何问题的 ,大家可以放心使用 !


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